Определение диастазы мочи
Альфа-амилаза секретируется слюнными и поджелудочной железами, небольшая ее активность имеется в тканях печени и скелетной мускулатуры. В отличие от большинства других ферментов она фильтруется в клубочках почек и содержится в моче. В качестве субстрата в методах определения α-амилазы чаще всего используют крахмал.
Активность α-амилазы выражается в граммах или миллиграммах крахмала, гидролизованного 1 л мочи при инкубации 37 °C за 1 с.
В нормальной моче содержится до 44 мг/(с × л), или до 120 мг/(ч × мл).
Повышение диастазы может происходить при хроническом панкреатите, холецистите, язвенной болезни.
Исследование мочевых камней
Оксалатовые камни обыкновенно образуются из щавелевокислого натрия. Мелкие камни – гладкие, светло-коричневого цвета, более крупные – неровные, окрашенные красителем крови в темно-коричневый цвет, отличаются довольно твердой консистенцией.
Уратовые (мочекислые) камни обычно состоят из мочевой кислоты и урата аммония. Для них характерны гладкая поверхность, желтая до коричневой окраска и довольно значительная твердость. Камни из урата аммония мягки, светло-желтого цвета (встречаются у детей).
Фосфатовые камни состоят из фосфорнокислого кальция или фосфорнокислой аммиак-магнезии. Они желтовато-белого цвета с неровной шероховатой поверхностью, легко крошатся. Часто выделяются в виде песка.
Карбонаты – небольшие камни беловатого цвета, круглой формы, с гладкой поверхностью.
Цистиновые камни желтоватого цвета и мягкой, как воск, консистенции. Встречаются редко, так же как ксантиновые и холестериновые.
Смешанные камни обыкновенно наслаиваются концентрически: их ядро образовано чаще всего из оксалатов или уратов, а окружающий слой – из фосфатов.
Изредка наблюдаются мочевые камни из индиго, ксантина или жиров.
Химическое исследование мочевых камней. Мочевой камень растирают в порошок, и небольшую часть последнего нагревают в пробирке в сухом виде. Если порошок органического характера – он чернеет и сгорает без остатка (ураты, цистин). Если порошок чернеет, но остается значительный остаток, то это указывает преимущественно на неорганическую природу камня. Часть порошка растворяют в нескольких каплях 10 %-ной азотной кислоты в фарфоровом сосуде и осторожно выпаривают. После охлаждения к остатку добавляют аммиак. Пурпурно-красная окраска указывает на присутствие уратов (мурексидная реакция). Часть порошка исследуют по схеме Hawk (см. табл. 9).
Таблица 9
Исследование мочевых камней по Hawk
Бактериологическое исследование мочи
Бактериологическое исследование бывает двух видов.
1. Бактериальный посев (бакпосев) – диагностический тест, при котором образец исследуемой жидкости, ткани или выделений помещается в емкость с питательной средой, способствующей активному росту находящихся в образце бактерий.
2. Бактериоскопия представляет собой микроскопический метод изучения бактерий, т. е. исследование под микроскопом.
После бактериоскопии ставится окончательный диагноз.
Мочу для бактериологического исследования выводят катетером в стерильный сосуд.
Количественное исследование бактерий в моче по Броду.
Техника исследования: мочу для исследования у женщин выводят стеклянным катетером, а у мужчин используют мочу при спонтанном мочеиспускании, после предварительного основательного вычищения ладьевидной ямки (расширение уретры в области головки полового члена) 50 %-ным спиртом. В нескольких чашках Петри с кровяным агаром производят посев из неразведенной и разведенной в различной степени мочи. По числу колоний определяют количество бактерий в 1 мл мочи (1 колония = 1 бактерия).
Проба с трифенилтетразоловым хлоридом для выявления значительной бактериурии
Принцип: активно дышащие бактерии восстанавливают бесцветный раствор 2,3,5-трифенилтетразолового хлорида до красного нерастворимого трифенил формазана.
Техника исследования: к 2 мл хорошо взболтанной мочи прибавляют 0,5 мл рабочего раствора (№ 2). Пробирка инкубируется в течение 5 ч при температуре 37 °C. При положительном результате пробы образуется красный осадок трифенил формазана (при наличии более 100 000 бактерий в 1 мл). При отсутствии красного осадка – проба отрицательна.
Проба является ориентировочной, но достаточной для клинических целей.
Бактериологическое исследование на микобактерии туберкулеза (МБТ)
Бактериологический метод применяется в тех случаях, когда бактериоскопическое исследование не дало положительных результатов.
К моче добавляют двойной объем 6 %-ного раствора серной кислоты, затем в течение 10 мин. энергично встряхивают и центрифугируют в пробирке, жидкость убирают, а осадок нейтрализуют путем добавления нескольких капель 3 %-ного раствора едкого натрия и проводят посев. Данный метод основан на способности микобактерий быть устойчивыми к воздействию кислот и щелочей.
В настоящее время найдены ускоренные бактериологические методы роста микобактерий на препаратах-мазках (по Прайсу) или выращивания на кровяной среде. При исследовании мочи на туберкулезные микобактерии следует помнить о том, что их с мочой выделяется относительно мало, и несколько больше МБТ обычно содержится в утренней моче. Поэтому для исследования собирают утреннюю порцию мочи. Еще одним методом обнаружения микобактерий является микроскопия осадка мочи, окрашенного по методу Циля – Нельсена (бактериоскопический метод). Мочу центрифугируют и готовят мазок из ее осадка. После подсыхания мазок исследуют при помощи иммерсионной микроскопии и просматривают 100 полей зрения. Микобактерии обнаруживаются как ярко-красные, тонкие, расположенные в одиночку или группами, в основном находящиеся вне клеток палочки.
Наиболее результативным бактериоскопическим методом выявления МБТ является люминесцентная микроскопия, которая позволяет повысить результативность исследования. При люминесцентной микроскопии микобактерии светятся золотисто-оранжевым светом на черном фоне (картина «звездного неба»). В особо трудных случаях диагностики нефротуберкулеза может быть применена биологическая проба (прививка мочи морской свинке). Свинка при заражении погибает от милиарного туберкулеза, или ее выводят из опыта через 1,5–2 месяца и производят гистологическое исследование внутренних органов.
К преимуществам посева мочи на питательные среды перед биологической пробой относится возможность определения чувствительности и устойчивости микобактерий туберкулеза к лекарственным препаратам. Поэтому исследование мочи на МБТ должно проводиться многократно от 5– до 10-кратного посева мочи.
Глава 10. Исследование кала
Кал – это конечный продукт переваривания пищевых веществ в организме человека, выделяющийся при дефекации. Для исследования кал собирают в чистую сухую, герметичную (желательно стеклянную) посуду. При бактериологическом исследовании используют специальные простерилизованные пробирки. Обычно в клинико-диагностическую лабораторию доставляют кал, полученный при утренней дефекации, не позднее 12 ч с момента взятия (хранение в холодильнике). Нельзя направлять материал для анализа после клизмы, приема лекарств, влияющих на работу кишечника (таких как белладонна, пилокарпин, прозерин и галантамин), использования свечей. В большинстве случаев анализ кала не требует специальной подготовки, рекомендуется за 2–3 дня избегать приема лекарственных средств, излишнего количества сладкой, мясной, мучной и жирной пищи. Анализ кала включает в себя ряд исследований. Макроскопическое исследование кала направлено на определение количества, консистенции, формы, цвета, запаха, наличия видимых на глаз остатков переваренной пищи и других включений, а также паразитов.
Каловые камни имеют только каловое происхождение. Это «слепки» гаустр (т. е. полостей на наружной поверхности ободочной кишки) толстого кишечника. Макроскопически в каловых массах можно увидеть целые особи взрослых паразитов (аскариды, острицы, власоглав), а также фрагменты широкого лентеца, бычьего и свиного цепней. Микроскопическое исследование позволяет получить наиболее детальное представление о степени переваренности пищевых веществ, об отделяемом стенки кишечника, о наличии паразитических организмов в различных отделах пищеварительной системы. При усиленной работе кишечника в каловых массах находится большое количество переваримой клетчатки. Клеточные элементы (клетки стенок кишечника, клетки крови, клетки опухолей) содержатся в кале со слизью. Для этого препарат кала готовят особым образом: слизистый, слизисто-гнойный, слизисто-кровянистый комочек выделяют из каловых масс, промывают физиологическим раствором и наносят на предметное стекло. Из клеток большое значение имеет обнаружение клеток стенки кишечника (кишечного эпителия). Появление его в большом количестве свидетельствует о воспалении толстого кишечника. Из клеток крови встречаются лейкоциты, располагающиеся скоплениями, – свидетельствуют о язвах или иных повреждениях кишечной стенки, и эритроциты, встречающиеся в кале при кровотечениях из органов пищеварения. Клетки злокачественных опухолей могут попадать в кал при расположении опухоли в прямой кишке. Диагностическое значение в этом случае приобретают не отдельные клетки, а обрывки тканей (группы клеток). Важным разделом исследования кала является химическое, включающее определение реакции кала, скрытой крови, желчных пигментов и ряда других веществ. Для определения реакции кала необходимо к каловым массам приложить смоченные дистиллированной водой полоски синей и красной лакмусовой бумаги. При нейтральной реакции (pH 6,8–7,6) испражнений цвет бумажки не изменяется; при кислой реакции (pH 5,5–6,7) приобретает красный цвет синяя бумажка, а красная не меняется; при щелочной реакции (pH 8,0–8,5) красная бумажка синеет, а синяя не меняется. В настоящее время многие лаборатории используют экспресс-методы определения реакции кала с помощью специальных диагностических тест-полосок (чаще всего это полоски фирмы «Биосенсор АН»).
