3. Диагноз подтверждается выявлением малярийных паразитов в препаратах крови – толстой капле и мазке . Для проведения этих методов используют капиллярную (из пальца) или венозную кровь. Кровь берут вне зависимости от цифр температуры.
При одноразовом негативном результате нельзя исключить диагноз малярии, и проводят повторное исследование через 8—12 ч. Выявить плазмодии легче в толстой капле крови, которая дает возможность в одном поле зрения микроскопа просмотреть большой объем крови. А дифференцировать вид возбудителя легче удается в мазке.
Необходимо учесть количественную и качественную характеристику результатов паразитологического обследования. Выраженная паразитемия (10 и более паразитов в одном поле зрения толстой капли крови, или более 100 × 109/л плазмодиев в 1 л крови, или поражение более 5 % эритроцитов) или выявление промежуточных стадий развития плазмодия чаще всего свидетельствуют о тяжелом течении тропической малярии с риском развития коматозной или иной злокачественной картины болезни.
Туляремия
Туляремия – преимущественно трансмиссивная особо опасная инфекция, характеризующаяся полиорганным поражением, обязательно лимфоаденитом, интоксикацией, лихорадкой. Заболевание – зооноз. Существует около 80 видов животных, способных быть источником инфекции. При этом в инфицировании может участвовать кровососущий переносчик (причем самый разнообразный – иксодовые клещи, комары, слепни, блохи и т. д.).
Для диагностики заболевания наряду с эпидемиологическим анамнезом, осмотром, исследованием периферической крови как подтверждение диагноза используют лабораторные методы исследования.
1. В общем анализе крови в начале болезни отмечаются умеренный или нормолейкоцитоз со сдвигом формулы влево, ускорение СОЭ. В последующие дни гематологические изменения выражены более итенсивно: лейкопения со сдвигом влево, лимфоцитоз и моноцитоз, СОЭ увеличена. При гнойных осложнениях картина гемограммы существенно меняется.
При генерализованной форме туляремии СОЭ ускорена до 50 мм/ч. В общем анализе крови отмечается умеренно выраженный лейкоцитоз со сдвигом формулы влево. Иногда бывает лимфо– и моноцитоз.
2. Бактериологический метод . Посев проводят на желточные или агаровые среды с добавлением цистеина, кроличьей дефибрированной крови и прочих питательных веществ. На желточную среду сеют кусочки печени, селезенки (взятые от животных), лимфатического узла и кровь для получения культуры возбудителя.
Получение и идентификацию возбудителя туляремии необходимо проводить в специально оборудованных лабораториях отделов особо опасных инфекций с использованием всех правил техники безопасности.
3. Биологический метод . Лучшим объектом для заражения являются белые мыши и морские свинки, так как они из всех лабораторных животных имеют повышенную чувствительность к туляремии. Заражают пунктатом бубонов, соскобом со дна язвы, смешанным с физиологическим раствором, отделяемым конъюнктивы и кровью (5–6 мл). Материал вводят лабораторным животным подкожно или внутрибрюшинно. Инфицированные животные погибают от туляремии максимум через две недели.
4. Из методов иммунодиагностики чаще всего применяют реакцию агглютинации с использованием туляремийного диагностикума. Результат считается положительным при титре 1: 100. Чувствительнее показала себя РНГА, причем она может применяться как для ранней, так и для ретроспективной диагностики. При этом антигеном является туляремийный эритроцитарный диагностикум.
5. Аллергическая диагностика . Кожно-аллергическая проба с туляремийным антигеном (тулярином) является ранним и очень ценным методом диагностики. Результаты реакции можно увидеть с 3—5-го дня болезни.
Чума
Чума – особо опасная инфекция, послужившая причиной гибели более 230 млн человек. Возбудитель – Yersinia pestis поражает лимфатические узлы, легкие, быстро проникает в организм, вызывая сепсис, серозно-геморрагические воспаления любой локализации в короткое время. Основной путь передачи – трансмиссивный (передача происходит от больного животного, чаще – грызуна, через укус блохи – человеку), а также воздушно-капельный – основной при эпидемиях.
Диагностика
Диагностика возбудителя чумы представляет трудности при выявлении спорадических случаев, которые могут давать эпидемические вспышки чумы. Развитие лихорадки, лимфаденита, пневмонии у лиц, находящихся в эпидемиологически опасном для чумы районе, требует исключения у таких лиц чумы.
Большую роль в диагностике чумы занимают методы лабораторной диагностики (бактериоскопический, бактериологический, серологический), которые должны осуществляться в специальных лабораториях, в которых должны быть соблюдены инструкции о режиме работы противочумных учреждений.
Для лабораторной диагностики чумы исследуют следующие материалы: пунктаты из бубона; содержимое везикул, пустул, карбункулов; отделяемое из язв; мокроту; материал из зева; отечную жидкость; кровь; мочу; рвотные массы. Кроме того, возбудителя можно обнаружить даже в воздухе, где побывал больной. При необходимости исследуют патологоанатомический материал: кусочки органов, взятых от трупов людей, верблюдов, грызунов.
1. Проведение экспресс-метода дает возможность предварительной постановки диагноза, о положительных результатах которого свидетельствуют специфическое свечение микробных тел при применении метода флюоресцирующих антител, присутствие в препаратах овоидных биполярно окрашенных палочек. Потом необходимо осуществлять дальнейшие мероприятия для выделения возбудителя.
2. Микробиологический метод . Все исследования, связанные с работой с патологическим материалом и выделением возбудителя, осуществляются в специальных лабораториях в защитных костюмах. При первичной бактериоскопии мазков обнаруживаются грамотрицательные овоидные биполярно окрашенные палочки. Обнаруженные данные не позволяют поставить окончательный диагноз.
3. Необходимо проведение биологического метода , который заключается в заражении и гибели зараженных морских свинок и белых мышей после введения исследуемого материала.
4. В лабораторной диагностике чумы часто применяются серологические методы: РНГА, РТНГА , при этом обнаружение признаков возбудителя не представляет трудности.
Сибирская язва
Сибирская язва – особо опасная инфекция, зооноз, характеризующаяся попаданием возбудителя (Bacillus anthracis) на кожу, слизистые оболочки, появлением серозно-геморрагического воспаления кожи, лимфатических узлов. Заболевание протекает в виде кожной формы – с образованием специфического карбункула или септической формы. Согласно классификации Громашевского сибирская язва относится к инфекциям наружных покровов.
Диагностика сибирской язвы проводится на основании клинико-эпидемиологических и лабораторных данных, не исключено применение инструментальных методов.
Методы лабораторной диагностики включают бактериоскопический, бактериологический и иммунологический методы.
1. Микробиологическая диагностика является основным методом. Заключается в получении возбудителя, культуры возбудителя из патологических материалов больного. Целью метода является идентификация возбудителя, используя полученные данные о его морфологических, культуральных, тинкториальных свойствах. В качестве материала для микробиологического исследования при кожной форме сибирской язвы можно использовать содержимое везикул и карбункулов. При септической форме материалом являются мокрота, рвотные массы, испражнения, кровь. Любые работы, осуществляемые с патологическим материалом больных особо опасными инфекциями или даже с культурой возбудителя, должны осуществляться в специальных лабораториях при полном соблюдении правил работы. Сначала проводят бактериоскопию мазков, определяя морфологические и тинкториальные свойства возбудителя – крупной, грамположительной, неподвижной палочковидной бактерии, спорообразующей, имеющей истинную капсулу (образует ее не только в организме человека и животного, но и на специальных питательных средах).
Проводят посев, изучая культуральные свойства. Возбудители сибирской язвы хорошо растут на простых питательных средах. В МПА (мясопептонный агар) появляются шероховатые колонии формы буквы R. Под малым увеличением микроскопа края колоний похожи на голову медузы или гриву льва.
2. Биологические методы – заражение лабораторных животных с дальнейшим исследованием на них течения болезни.
3. Методы иммунодиагностики . Для выявления антигена в исследуемом материале применяют РИФ и реакцию преципитации Асколи с диагностической преципитирующей сибиреязвенной сывороткой. Сущность этой реакции – сибиреязвенная сыворотка содержит антитело, специфичное только для антигена сибиреязвенной бациллы. При контакте они реагируют, образуя преципитат (осадок). С целью ранней диагностики часто применяют иммунофлюоресцентный метод, который раньше всех других методов может дать положительный результат. Но ненадежен и требует подтверждения другими методами.