Посевы считаются наиболее надежным способом установления трихомонадной инфекции.
I. В среде Линча . Делают посев содержимого влагалища в бульон, налитый в пробирку. Оставляют в термостате при 37 °C на 3 дня. Среду приготовляют следующим способом: к 10 мл 0,5 %-ного раствора NaCl прибавляют 1 мл инактивированной при 56 °C за 30 мин. человеческой сыворотки и 5000 Е пенициллина, для предупреждения роста бактерий.
II. Среда Горбовской . Десять миллилитров фосфатного буфера с pH 7,0–7,6, к которому прибавляют 5 %-ной лошадиной сыворотки и стерильного раствора рисового крахмала. Оставляют в термостате при 37 °C на 3–4 дня. Проводят ежедневный контроль роста трихомонад: трихомонад ищут в нативном препарате или в препарате, окрашенном по Гимза.
III. Среда Добеля – Лейдлоу . Состоит из 10 частей физиологического раствора и 1 части сыворотки крови.
Исследование на гонококки
При подозрении на гонококковую инфекцию у женщины необходимо исследовать секрет из цервикального канала, уретры и эвентуально из прямой кишки. У маленьких девочек берут секрет из преддверия влагалища и из влагалища. Исследование влагалищного секрета на гонококки у взрослой женщины не проводится из-за обилия банальной бактериальной флоры, которая может замаскировать гонококки.
Наиболее распространенными методами диагностики гонореи являются бактериоскопический, культуральный и серологический.
Исследование при острой гонорее . Приготовление препаратов из цервикального и уретрального секретов и окрашивание по Леффлеру и по Граму. Рекомендуют окрашивать разведенным метиленовым синим из-за большого аффинитета гонококков к метиленовому синему (1: 10 000).
Исследование при хронической гонорее
1. Под микроскопом исследуют препараты из цервикального, уретрального секретов и из секрета прямой кишки, а также из секрета бартолиниевых желез – путем массажа выжимают секрет в преддверие влагалища, берут материал и делают мазки на предметном стекле.
2. Из полученного секрета делают посевы на асцитном агаре (1: 3), нагретом до 37 °C, или на сывороточном агаре с влажной поверхностью и культивируют в термостате в течение 2 дней.
3. Серодиагностика: устанавливают комплементосвязывающие антитела в сыворотке больной. Берут около 5 мл крови из вены сухим шприцем и иглой в чистую, сухую пробирку. Выделившейся сывороткой, которая не должна иметь признаков гемолиза, производят реакцию фиксации комплемента, подобную реакции Вассермана.
4. Методы провокации:
а) неспецифический метод провокации;
б) специфический метод провокации (вакцинация).
При хронической гонорее у женщины очень трудно установить гонококки, которые часто гнездятся глубоко в криптах и железах слизистой оболочки. Здесь приходится прибегнуть к методам провокации, после которых берут секреты для микроскопического исследования или для посева – через некоторое время после провокации.
I. Неспецифические методы – консумация спиртных напитков; протеинотерапия; аутогемотерапия; промывание 0,5 %– ным раствором нитрата серебра, 10 %-ным раствором NaCl цервикального канала; нагревания ультратермом; интравагинальное грязелечение; инъецирование цервикального секрета в шейку матки; а также такие факторы, как менструация и половое сношение, – могут играть роль провокатора.
II. Специфические методы . Вакцинация (внутримышечно) гоновакциной (2 млрд микробных тел в 1 мл); регионерная вакцинация – введение гоновакцины в слизистую оболочку шейки матки и в уретру; кожная вакцинодиагностика гоновакциной (внутрикожно).
Для диагностирования гонококков в секретах, кроме классической микроскопической картины, – преимущественно внутриклеточное расположение шахматовидно собравшихся гонококков в нейтрофильных лейкоцитах при острой гонорее и преимущественно внеклеточное расположение при хронической гонорее – важно иметь в виду возможность появления дегенеративных форм гонококков, в особенности после неполного лечения сульфамидами или пенициллином.
Некоторые авторы описывают в первой стадии дегенерации гонококков появление слабо окрашивающихся микро– и макрогонококков; во второй стадии они делаются полукруглыми; в третьей стадии округляются в виде шарообразных диплококков и в четвертой стадии сжимаются в виде отдельных точек.
Обычно через 10–12 ч после начала лечения пенициллином гонококки исчезают из секретов уретры и цервикального канала.
Характерны три микроскопические картины исследуемых секретов (Бакшт).
I. Обилие нейтрофильных лейкоцитов с ярко окрашенными ядрами и протоплазмой, с вне– и внутриклеточно расположенными гонококками, при отсутствии другой бактериальной флоры. Эта картина указывает на типичную гонорею.
II. Цитологическая картина похожа на первую, но здесь отсутствуют и гонококки, и другая бактериальная флора. Эта картина вызывает большие сомнения относительно латентной гонореи. Необходимо прибегнуть к методу провокации и сделать повторные препараты из цервикального и уретрального секрета для поисков гонококков.
III. Цитологическая и бактериоскопическая картина отличается от первых двух: ядра лейкоцитов размазанные, дегенерировавшие, протоплазма не просматривается; обилие банальной флоры – кокки, диплококки, стафилококки, палочки Дедерлейна и др. Эта картина не характерна для гонореи, а после нее может служить признаком начинающегося выздоровления.
Появление палочек Дедерлейна уже говорит о выздоровлении от гонореи и практически исключает нахождение гонококков в секрете.
Культуральный метод имеет очень большое значение. К нему следует прибегать во всех случаях, когда подозревают гонорею, а бактериоскопически гонорею не находят. Материал засевают на 2 чашки Петри, путем втирания. Наиболее простой средой для выращивания гонококков является мясо-пептонный агар, удовлетворительный рост получают и на среде Бейли или плацентарной среде.
Гонококк на искусственных питательных средах обычно вырастает через 24 ч, при пересевах с транспортных сред и при посевах материала от женщин с хронической гонореей рост возбудителя наступает позднее. Рекомендуется наблюдать за ростом в течение 5–7 дней. Через 24 ч образуются прозрачные бесцветные или бледно-желтоватой окраски мелкие колонии, имеющие вид росы. Края колоний ровные, гладкие, поверхность блестящая, ровная, возвышается над средой наподобие срезанного шара. Через 48–72 ч колонии увеличиваются в размерах, темнеют, центр становится желтовато-коричневым. Затем колония уплощается. Иногда на поверхности колонии гонококка образуются вал или многочисленные узелковые разрастания – дочерние колонии.
Выросшую колонию идентифицируют по внешнему виду и на основании результатов последующего микроскопического исследования мазков из нее, окрашенных по Граму. Гонококк из культуры, выросшей через 24 ч, обычно имеет форму диплококка или грамотрицательных кокков одинаковой величины. Через 72–96 ч культура становится полиморфной и по Граму окрашивается неравномерно.
Исследование отделяемого молочных желез
Молоко представляет собой секрет молочной железы, обладающий большой питательностью и содержащий почти все необходимые составные части для полноценного питания грудного ребенка (см. табл. 11–13).
Таблица 11
Свойства молока
Таблица 12
Состав молока
Таблица 13
Состав молока в г/100 мл
В молочной железе лактоза образуется из глюкозы или гликогена. Она является единственным углеводом, находящимся в значительных количествах в молоке, и имеет большое значение для питания. Содержание лактозы в молоке довольно постоянно и практически не меняется при изменениях диеты матери и при колебаниях уровня сахара в крови.
Точные статистические исследования установили, что молоко человека содержит лактозы 7 г/100 мл со стандартными отклонениями ± 0,5 г.
Жиры в молоке имеют вид глобул (шариков), хорошо видны под микроскопом при малом увеличении. Размер шариков варьирует в определенных границах. Самые большие имеют диаметр приблизительно в 7 раз больше, чем самые маленькие.
Жиры человеческого молока характеризуются более высоким содержанием олеиновой кислоты и относительным дефицитом жирных кислот с короткой цепью в сравнении с коровьим молоком.
Женское молоко имеет низкое содержание протеинов. Главным характерным белком молока является казеин. Он представляет собой комплекс фосфопротеинов, составляющий 1/3 всех белков человеческого молока и 5/6 всех белков коровьего молока. Его продуцирует молочная секретирующая железа. Некоторые из его составных аминокислот происходят из собственных аминокислот крови, а не из плазмопротеинов (изотопная идентификация). Фосфор казеина также получается из неорганического фосфора крови.
