Подсчет мегакариоцитов
Число мегакариоцитов можно оценить ориентировочно, наблюдая под небольшим увеличением микроскопа мазки пунктата костного мозга, либо подсчитывать количество клеток в счетной камере.
В норме у здоровых взрослых людей количество мегакариоцитов составляет 63 ± 10 или 83 ± 13,86 в 1 мкл пунктата. У детей в возрасте 5 месяцев – 3,5 года количество мегакариоцитов выше, чем у взрослых (116 ± 10,8 в 1 мкл пунктата).
Увеличение количества мегакариоцитов является симптомом хронических лейкозов миелопролиферативной природы. Мегакариоцитоз костного мозга также встречается при геморрагической тромбоцитопении, кровопотере, тромбоцитопенической пурпуре. Уменьшение числа мегакариоцитов характерно для острых лейкозов и лимфопролиферативных заболеваний.
Перед проведением морфологического исследования пунктата проводится приготовление и окраска препаратов по принципу приготовления препаратов периферической крови.
Метод Аринкина . Производят дифференцировку форменных элементов в окрашенных мазках пунктата с выведением миелограммы, т. е. процентного содержания различных миелокариоцитов.
Просматривают препараты под малым увеличением для представления о клеточности костного мозга, наличии мегакариоцитов или для исключения патологических элементов. В случае выявления таковых необходимо нанести каплю масла на препарат, перевести на иммерсионный объектив и смотреть морфологию этих элементов.
После просмотра мазков под малым увеличением наносят каплю иммерсионного масла на мазок, погружают в него иммерсионный объектив и приступают к дифференцированию форменных элементов. Для подсчета миелограммы рекомендуется дифференцировать не менее 500 миелокариоцитов в разных участках препарата. Подсчитывают все встречающиеся в поле зрения клетки, откладывая их количество с помощью 11-клавишного счетчика. После подсчета 500 клеток делят число клеток каждого вида на 5 и выдают ответ в процентах.
Морфология клеток стромы костного мозга
При изучении клеточного состава костного мозга следует иметь в виду клетки, относимые к элементам стромы костного мозга. В нормальном пунктате костного мозга они составляют не более 0,5 % всего клеточного состава.
При различных патологических состояниях их число увеличивается. В свете современных представлений к стромальным клеткам относят ретикулярные клетки, фибробласты и фиброциты, а также остеобласты. Стромальные клетки своим происхождением не связаны со стволовой кроветворной клеткой.
Ретикулярные клетки можно видеть при опустошении костного мозга при апластических состояниях. Они находятся в местах перекрестов ретикулярной сети. Их нитчатым отросткам следует приписать образование ретикулярной стромы костного мозга.
Фибробласты
По морфологическим признакам определить фибробласт (или фиброцит) нетрудно.
Остеобласты – клетки, участвующие в костеобразовании.
По морфологическим чертам остеобласт может быть сходен с проплазмоцитами и миеломными клетками.
Морфология клеток эритробластического ростка
Эритробласт берет начало от эритропоэтинчувствительного предшественника, относящегося к классу унипотентных (с разнообразными возможностями к дифференцировке) клеток. Эритробласт является морфологически различимой родоначальной клеткой элементов эритроидного ростка, конечной стадией развития которых являются эритроциты. Содержание гемоглобина в эритробласте окончательно не выяснено. Размеры эритробластов варьируют в разных пределах. Нежная структура ядер с ядрышками определяет молодость клетки. Цитоплазма отличается своеобразием интенсивной базофильной окраски с не всегда отчетливо выраженной зоной просветления вокруг ядра.
Пронормоциты . Так же как и их предшественники, они имеют различные размеры.
Базофильные и полихроматофильные нормоциты . Они также имеют большие или меньшие размеры. Базофильные и полихроматофильные нормоциты имеют грубую структуру ядер с чередованием темных и светлых участков, отмечается колесовидная архитектоника хроматина.
Морфология клеток гранулоцитарного ростка
Миелобласт . Миелобласт является родоначальной клеткой элементов гранулоцитарного ростка. Как и эритробласт, миелобласт берет свое начало от клетки-предшественницы миелопоэза.
Диаметр миелобластов варьируется от 12 до 22 мкм.
Морфология клеток мегакариоцитарного ростка . Мегакариобласт является родоначальной клеткой мегакариоцитарного ряда. Мегакариобласт – небольшая клетка: достигает 20–25 мкм. Ядро имеет все черты бластных клеток, округлое, хроматиновая сеть имеет правильное соединение нитей, равномерное и нежное, но при этом с более сильной красной или красно-фиолетовой окраской ядра; это придает грубоватость ядру. В ядре видны ядрышки, окруженные валиком уплотненного хроматина. Цитоплазма сравнительно небольшая, часто обрывистая, не окружающая все ядро. Она интенсивно базофильная, с зоной просветления вокруг ядра, зернистости не содержит.
Промегакариоцит представляет собой следующий этап развития клетки мегакариоцитарного ряда. Крупными размерами он обязан полиплоидному набору хромосом мегакариобласта. Ядро грубой структуры с чертами полиморфизма и сегментации. Масса цитоплазмы гораздо больше ядра; цитоплазма отличается выраженной базофилией. Дальнейший этап развития промегакариоцита приводит к тому, что ядро клетки становится все более дольчатым, с грубой структурой. Цитоплазма заметно теряет свою базофильную окраску и приобретает фиолетовые оттенки, обусловленные тем, что в ней появляется обильная азурофильная зернистость – предстадии кровяных пластинок.
Мегакариоцит – клетка гигантских размеров. Средний диаметр мегакариоцита – 50–60 мкм, но возможно 100 мкм и более. Ядро принимает самые необыкновенные и причудливые формы без каких-либо характерных черт (полиплоидия). Структура ядра грубая, с обилием складок. Масса цитоплазмы часто преобладает над массой ядра.
Изучение костного мозга позволяет проследить все стадии образования кровяных пластинок. У зрелых мегакариоцитов по периферии цитоплазмы можно видеть отхождение кровяных пластинок в виде цепочек. Отрыв (отшнурование) пластинок в дальнейшем ведет к старению мегакариоцита с распадом ядра на отдельные фрагменты.
Тромбоциты, или кровяные пластинки, являются зрелыми элементами крови. Тромбоциты – истинные клетки только у некоторых низших позвоночных. В нормальных условиях количество тромбоцитов в 1 мм3 крови колеблется от 200 000 до 400 000.
Кровяные пластинки имеют округлую или овальную форму.
Периферическая часть, окрашенная в светлые базофильные тона, называется гиаломером; она бесструктурна. Центральная часть пластинки – грануломер, или хромомер, розового или розово-фиолетового оттенка, состоит из мелких гранул. В патологических условиях тромбоциты приобретают различные, иногда причудливые формы, но всегда их легко определить. Нормальные кровяные пластинки имеют диаметр 1,5–3 мкм. Кровяные пластинки диаметром 1 мкм называются микропластинками, более 3 мкм – макропластинками (мегапластинками).
Промиелоцит нейтрофильный . Посредством митотического деления и одновременной дифференцировки миелобласт переходит в другую стадию развития зернистого ряда лейкоцитов – промиелоцит. Эта клетка еще повторяет морфологические свойства миелобласта. Промиелоцит любого ряда гранулоцитов является самой крупной клеткой, достигая 25 мкм, и содержит наиболее обильную зернистость. Необходимо отметить многообразие как в размерах клеток и особенностях соотношения ядра и цитоплазмы, так и в структуре и форме ядер.
В нейтрофильных промиелоцитах цитоплазма содержит обильную полиморфную зернистость различных цветовых оттенков. Обращает на себя внимание разное обилие этой зернистости. Часть зернистости, расположенная над ядрами, не всегда видима. Это обусловлено тем, что те элементы грануляции, которые по окраске близки к азурофильной или к нейтрофильной субстанции, перестают быть заметными на фоне красно-фиолетового ядра.
Миелоцит нейтрофильный. В онтогенетическом ряду элементов гранулоцитарного ряда миелоциты занимают видное место. На этой стадии развития в них завершается созревание специфической зернистости, по которой определяются клетки нейтрофильного, эозинофильного и базофильного ряда. Миелоцит является последней гранулоцитарной клеткой, способной к митотическому делению. Они достигают диаметра 13–15 мкм и более. Ядра их то округлые, то овальные с несколько неправильными очертаниями. Структура ядра определяется чередованием темных и светлых участков, чем знаменуется отход миелоцита от нежной структуры его предшественников – миелобласта и промиелоцита.
